Plasmide Double Nickase (h) p38IP: sc-409288-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) p38IP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide p38IP Double Nickase (h) et le plasmide p38IP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SUPT20H. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: p38IP Antibody (C-7): sc-374665
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) p38IP | sc-409288-NIC | 20 µg | $410.00 |
SUPT20H code pour p38IP, un adaptateur conservé qui s’associe à la signalisation MAPK p38 et à la machinerie de régulation de la chromatine afin de coordonner la transcription en réponse au stress. p38IP a été associé à la modulation des sorties de la voie MAPK et à la régulation de programmes d’expression génique qui influencent la progression du cycle cellulaire, la différenciation et les réponses inflammatoires. Par ces fonctions, SUPT20H/p38IP contribue à l’homéostasie cellulaire en conditions de stress génotoxique et environnemental, et il est étudié dans des contextes où une dérégulation de la signalisation MAPK et du contrôle transcriptionnel est impliquée dans des phénotypes pertinents pour les maladies, notamment une prolifération altérée et des perturbations de la signalisation immunitaire.
p38IP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SUPT20H dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SUPT20H. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SUPT20H. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SUPT20H.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.