OPN1MW Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416637-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- OPN1MWO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase OPN1MW (h) e o Plasmídeo Double Nickase OPN1MW (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para OPN1MW. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
OPN1MW Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416637-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OPN1MW Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416637-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OPN1MW codifica a opsina sensível a comprimentos de onda médios (M-opsina), um receptor acoplado à proteína G de fotorreceptores cones que se liga ao 11-cis-retinal e inicia a fototransdução em resposta à luz verde. Quando ativada, ela aciona a cascata de sinalização transducina dos cones (GNAT2)–PDE6, reduzindo os níveis de cGMP e regulando a atividade de canais iônicos dependentes de cGMP para controlar o potencial de membrana e a liberação sináptica nos cones da retina. A expressão e a localização adequadas de OPN1MW sustentam a estrutura do segmento externo dos cones e a discriminação de cores, conectando-o a processos centrais da sinalização visual e da fisiologia retiniana. Variações genéticas ou desregulação em OPN1MW estão associadas a deficiências hereditárias da visão de cores e a fenótipos relacionados à função dos cones, tornando-o relevante para estudos do desenvolvimento da retina, do tráfego de opsinas e da integridade das redes de fototransdução.
OPN1MW O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus OPN1MW em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de OPN1MW. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função OPN1MW. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com OPN1MW interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.