Oma1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402953

概要

OMA1は、ミトコンドリア内膜に埋め込まれたストレス応答性メタロプロテアーゼをコードしており、OPA1などの基質をプロテアーゼ作用で切断・加工することでクリステ構造を再編し、ミトコンドリアの融合—分裂ダイナミクスを制御するなど、ミトコンドリア品質管理に寄与します。Oma1活性はミトコンドリア膜電位の脱分極やタンパク質毒性ストレスによって誘導され、酸化的リン酸化の効率、活性酸素種（ROS）処理、ならびにマイトファジーに連動した監視機構に影響するシグナルを統合します。オルガネラ形態とバイオエネルギー代謝への影響を通じて、OMA1はアポトーシス感受性や代謝適応を司る経路において研究されています。OMA1–OPA1軸の機能異常は、神経変性、心代謝ストレス、その他ミトコンドリアダイナミクス障害が関与する疾患に関連するミトコンドリア機能不全の表現型と結び付けられています。

Oma1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOMA1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OMA1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OMA1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Oma1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Oma1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OMA1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Oma1の機能に不可欠なOMA1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OMA1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Oma1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOma1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OMA1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Oma1 HDRプラスミド（h）および Oma1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOMA1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOMA1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。