Oma1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402953

Übersicht

OMA1 kodiert eine stressaktivierte Metalloprotease, die in der inneren Mitochondrienmembran verankert ist und zur mitochondrialen Qualitätskontrolle beiträgt, indem sie Substrate wie OPA1 proteolytisch verarbeitet, um die Cristaearchitektur umzugestalten und die Dynamik von mitochondrialer Fusion und Spaltung zu regulieren. Die Aktivität von Oma1 wird durch mitochondriale Depolarisation und proteotoxischen Stress ausgelöst und integriert Signale, die die Effizienz der oxidativen Phosphorylierung, den Umgang mit reaktiven Sauerstoffspezies und die mit Mitophagie verknüpfte Überwachung beeinflussen. Aufgrund seines Einflusses auf Organellenmorphologie und Bioenergetik wird OMA1 in Signalwegen untersucht, die die Anfälligkeit für Apoptose und die metabolische Anpassung steuern. Eine fehlregulierte Funktion der OMA1–OPA1-Achse wurde mit Phänotypen mitochondrialer Dysfunktion in Verbindung gebracht, die für Neurodegeneration, kardiometabolischen Stress und andere Erkrankungen relevant sind, bei denen beeinträchtigte mitochondriale Dynamik eine Rolle spielt.

Das Oma1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des OMA1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des OMA1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von OMA1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Oma1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von OMA1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Oma1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf OMA1-Exone abzielen, die für die Oma1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere OMA1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Oma1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Oma1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des OMA1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Oma1 HDR-Plasmid (h) und Oma1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von OMA1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten OMA1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.