OGFR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407303

概要

オピオイド成長因子受容体（OGFR）は、広く発現している非典型的なオピオイド受容体であり、[Met5]-エンケファリン（オピオイド成長因子）と結合して細胞増殖および組織恒常性を制御します。OGFRシグナル伝達は、OGF–OGFR軸を通じて最もよく特徴づけられており、サイクリン依存性キナーゼ阻害因子（CDK阻害因子）経路に影響を与え、さまざまな細胞種でDNA合成を抑制することで細胞周期の進行を調節します。この受容体は上皮の更新、免疫細胞や間質細胞の挙動、ストレス応答性の増殖制御に関与するとされ、OGFRの生物学は、がん細胞増殖、創傷修復、炎症性病態などの文脈と結び付けられています。そのため、OGFR発現の撹乱は、内因性の増殖抑制シグナルネットワークおよびそれらと有糸分裂促進（ミトジェン）経路とのクロストークを解析する目的で一般的に用いられます。

OGFR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOGFR遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OGFR内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OGFRのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OGFRタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OGFRシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OGFR欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OGFRの機能に不可欠なOGFRエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OGFRゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OGFR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOGFR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OGFR遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OGFR HDRプラスミド（h）および OGFR HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOGFRホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOGFR標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。