Plasmide CRISPR/Cas9 KO OB-cadherin (h): sc-401051
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- OB-cadherin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique OB-cadherin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: OB-cadherin Antibody (F-3): sc-365867
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO OB-cadherin (h) | sc-401051 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CDH11 code l’OB‑cadhérine, une cadhérine classique qui assure une adhésion cellule–cellule homophile dépendante du calcium et contribue à l’architecture tissulaire ainsi qu’à la signalisation intercellulaire. Par ses interactions avec les caténines, l’OB‑cadhérine relie les jonctions d’adhérence au cytosquelette d’actine et influence des voies qui régissent la polarité cellulaire, la migration et la mécanotransduction, notamment en modulant la disponibilité de la β‑caténine et le remodelage des jonctions. CDH11 est fortement exprimé dans les lignages mésenchymateux et les compartiments stromaux, où il soutient l’organisation de la matrice extracellulaire et les programmes de motilité cellulaire. Une expression dérégulée de CDH11 a été associée au remodelage fibreux, à des pathologies articulaires inflammatoires et à des interactions tumeur–stroma impliquées dans l’invasion et la formation de niches métastatiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO OB-cadherin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDH11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDH11, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDH11 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine OB-cadherin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDH11 pour l'étude de la signalisation de OB-cadherin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CDH11 essentiels à la fonction de OB-cadherin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDH11 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le OB-cadherin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le OB-cadherin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDH11. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le OB-cadherin plasmide HDR (h) et le OB-cadherin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDH11 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDH11 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.