OB-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401051

概要

CDH11 は OB-カドヘリンをコードしており、OB-カドヘリンはカルシウム依存的な同種（ホモフィリック）細胞間接着を担う古典的カドヘリンで、組織構築および細胞間シグナル伝達に寄与します。OB-カドヘリンはカテニンとの相互作用を介して接着結合（アドヘレンスジャンクション）をアクチン細胞骨格に連結し、細胞極性、遊走、メカノトランスダクションを制御する経路に影響を与えます。これには、β-カテニンの利用可能性の調節や、接着部位のリモデリングが含まれます。CDH11 は間葉系系譜およびストローマ区画で顕著に発現し、細胞外マトリックスの組織化や細胞運動性プログラムを支持します。CDH11 発現の異常は、線維化リモデリング、炎症性の関節病変、ならびに浸潤や転移ニッチ形成に関わる腫瘍―ストローマ相互作用と関連づけられています。

OB-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDH11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDH11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDH11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OB-cadherinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OB-cadherinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDH11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OB-cadherinの機能に不可欠なCDH11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDH11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OB-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOB-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDH11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OB-cadherin HDRプラスミド（h）および OB-cadherin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDH11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDH11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。