Nup88 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422392

概要

Nup88（ヌクレオポリン88 kDa）は核膜孔複合体（NPC）を構成する必須因子であり、核‐細胞質間輸送および核膜全体の構造維持に寄与します。他のヌクレオポリンや輸送受容体と相互作用することで、Nup88は転写プログラム、細胞周期の進行、ストレス応答性シグナル伝達を制御するタンパク質やRNAの輸送（トラフィッキング）を調節します。Nup88の発現量や局在の変化は、核輸送の正確性やゲノム維持の破綻と関連づけられており、これらの過程は増殖や神経発生に関わる状況でしばしば攪乱されます。そのためマウスNup88は、正常生理および疾患関連の細胞状態における、核膜孔依存的なシグナル伝達や遺伝子発現制御を解明するために広く用いられています。

Nup88 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNup88遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nup88内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nup88のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nup88タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nup88シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nup88欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nup88の機能に不可欠なNup88エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nup88ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nup88 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNup88 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nup88遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nup88 HDRプラスミド（m）および Nup88 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNup88ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNup88標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。