Date published: 2026-7-18

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Nup50 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406550

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Nup50 CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在Nup50基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Nup50: sc-398993,通过WB, IF或者IHC分析
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    Nup50 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-406550
    20 µg
    $397.00

    概述

    NUP50 编码核孔复合体的动态组分 Nup50。Nup50 通过调控依赖 importin-α/β 的货物转运以及其在细胞核内的回收过程,参与核质运输。借助其在核篮(nuclear basket)处的相互作用,Nup50 有助于将核进口动力学与细胞周期进程、转录调控以及核结构维持等更广泛的过程相协调。核转运通路与核孔复合体稳态的破坏常与基因组不稳定性及信号程序异常相关,这些变化与癌症生物学以及其他以核质分隔受损为特征的疾病密切相关。因此,NUP50 常在核转运调控、蛋白质稳态(proteostasis)和应激响应信号通路等研究背景下被重点关注。

    Nup50 CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中NUP50基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对NUP50基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏NUP50开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使Nup50蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建NUP50缺失的细胞模型,用于Nup50信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 Nup50 功能至关重要的 NUP50 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 NUP50 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 Nup50 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Nup50 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 NUP50 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 Nup50 HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 Nup50 HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由NUP50同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定NUP50靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。