NOS2/iNOS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400066-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NOS2/iNOSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NOS2/iNOS (h) e o Plasmídeo Double Nickase NOS2/iNOS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NOS2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NOS2/iNOS Anticorpo (C-11): sc-7271
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NOS2/iNOS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NOS2/iNOS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **NOS2** codifica a sintase de óxido nítrico induzível (**iNOS**), uma enzima independente de Ca2+ que gera óxido nítrico em alta quantidade a partir de L-arginina durante a estimulação inflamatória. O NO derivado da iNOS modula a sinalização imune inata, a defesa antimicrobiana e o estresse oxidativo/nitrosativo por meio de efeitos na homeostase redox, na S-nitrosilação e na formação de espécies reativas de nitrogênio. A expressão de NOS2 é regulada por vias acionadas por citocinas e por receptores de reconhecimento de padrões, incluindo as cascatas de NF-κB, JAK/STAT e MAPK. A atividade desregulada de NOS2 tem sido associada à inflamação crônica e à lesão tecidual e é frequentemente estudada no contexto da biologia do microambiente tumoral, da neuroinflamação e das respostas ao estresse cardiometabólico.
NOS2/iNOS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NOS2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NOS2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NOS2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NOS2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.