NOR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401813

概要

NR4A3はオーファン核内受容体NOR-1（NR4A3）をコードしており、リガンド非依存性の即時早期型転写因子として、細胞外からの刺激を迅速に遺伝子発現プログラムへと結び付けます。NOR-1は、MAPK/ERKシグナル伝達やその他のストレス応答性経路の下流にある転写ネットワークを調節することで、細胞分化・増殖・アポトーシス・代謝適応を制御し、炎症および免疫関連遺伝子の発現にも影響し得ます。NR4A3活性の破綻は腫瘍性や代謝性の表現型と関連付けられており、NR4A3の再構成は一部の肉腫にも関与するとされています。これらの知見は、疾患関連の状況における転写制御機構の解明研究においてNR4A3が重要であることを示しています。

NOR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNR4A3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NR4A3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NR4A3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NOR-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NOR-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NR4A3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NOR-1の機能に不可欠なNR4A3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NR4A3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NOR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNOR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NR4A3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NOR-1 HDRプラスミド（h）および NOR-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNR4A3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNR4A3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。