Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401641-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Double-Nickase-Plasmid (h) und Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CHRNB2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2: sc-58596
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401641-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401641-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHRNB2 kodiert die β2‑Untereinheit neuronaler nikotinischer Acetylcholinrezeptoren (nAChR), ligandengesteuerter Ionenkanäle, die sich zusammen mit anderen nAChR‑Untereinheiten zu heteropentameren Rezeptoren assemblieren und eine schnelle synaptische Transmission vermitteln. Nach Bindung von Acetylcholin oder Nikotin leiten β2‑haltige Rezeptoren Kationen und erhöhen dadurch die intrazellulären Na⁺‑ und Ca²⁺‑Konzentrationen; zugleich koppeln sie an aktivitätsabhängige Signalnetzwerke, die Erregbarkeit, Neurotransmitterfreisetzung und synaptische Plastizität prägen. Diese cholinerge Signalübertragung überschneidet sich mit Signalwegen, die die Calciumhomöostase, die MAPK/ERK‑Signalgebung und die Funktion dopaminerger Schaltkreise regulieren. Genetische Variationen oder eine veränderte Expression von CHRNB2 wurden mit neuropsychiatrischen und neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht; zudem wird das Gen im Kontext von Nikotinabhängigkeit und anfallsassoziierten Erkrankungen untersucht.
Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CHRNB2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CHRNB2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CHRNB2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CHRNB2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.