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Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2CRISPR激活质粒(h) | sc-401641-ACT | 20 µg | $397.00 |
CHRNB2 编码神经元烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的 β2 亚基。nAChR 属于配体门控阳离子通道,可与 α 亚基组装,从而调控膜兴奋性以及钙依赖性信号传导。含 β2 的 nAChR 将胆碱能神经传递与下游通路相耦联,影响中枢神经系统中的突触可塑性、神经递质释放以及神经环路层面的调制。CHRNB2 表达水平或受体组成的改变与多种神经精神与神经发育相关表型有关,包括尼古丁依赖和癫痫易感性,这反映了其在兴奋/抑制平衡中的作用。作为膜受体亚基,CHRNB2 也与胆碱能信号网络中受体的组装、转运以及药理学敏感性研究密切相关。
Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CHRNB2的表达。
Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CHRNB2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CHRNB2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CHRNB2位点,并能够研究内源性位点上依赖于Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CHRNB2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。