Niban Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405758

Visão geral

FAM129A codifica a Niban, uma proteína citoplasmática responsiva ao estresse, implicada na regulação da sobrevivência celular e na adaptação a condições adversas, como estresse oxidativo e do retículo endoplasmático. A Niban tem sido associada à modulação da apoptose e de vias de sinalização relacionadas à autofagia, sendo frequentemente estudada no contexto dos desfechos das vias PI3K/AKT e MAPK, que moldam a proliferação e a tolerância ao estresse. Alterações na expressão de FAM129A foram relatadas em múltiplos tipos de câncer e são usadas como um marcador molecular da aptidão de células tumorais e de sua adaptação ao estresse. Essas características tornam a Niban um alvo útil para dissecar redes de sinalização que conectam respostas celulares ao estresse ao controle do crescimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Niban (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FAM129A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FAM129A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FAM129A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Niban.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FAM129A para a investigação da sinalização de Niban, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FAM129A críticos para a função Niban
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FAM129A para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Niban Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Niban Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FAM129A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Niban Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Niban (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FAM129A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FAM129A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.