NFRκB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407203-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NFRκBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NFRκB (h) e o Plasmídeo Double Nickase NFRκB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NFRKB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NFRκB Anticorpo (A-12): sc-514977
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NFRκB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407203-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NFRκB Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407203-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFRKB (proteína de ligação ao fator nuclear relacionado a kappa-B) codifica um fator de ligação ao DNA originalmente identificado por meio de interações com elementos regulatórios do NF-κB e está implicado em programas de controle transcricional ligados à organização da cromatina. A proteína tem sido descrita como um componente associado a complexos de remodelamento de cromatina dependentes de ATP, sustentando funções na regulação da expressão gênica, na manutenção do genoma e em processos nucleares acoplados ao ciclo celular. Por suas conexões com circuitos transcricionais adjacentes ao NF-κB, a NFRKB é estudada em contextos nos quais a sinalização inflamatória se cruza com o remodelamento nuclear e as respostas ao estresse. A desregulação da cromatina e as saídas transcricionais relacionadas ao NF-κB são frequentemente investigadas na biologia do câncer e em modelos de doenças associadas ao sistema imune, tornando a NFRKB um nó útil para estudos mecanísticos de transcrição e regulação nuclear.
NFRκB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NFRKB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NFRKB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NFRKB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NFRKB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.