Neuronatin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421919

개요

Mouse Nnat는 신경계와 내분비 조직에 풍부하게 발현되는, 작은 크기의 각인 유전자(imprinted)이자 발달 단계에 따라 조절되는 단백질인 neuronatin을 암호화합니다. Neuronatin은 주로 소포체(ER) 막에 국재하며, 세포내 칼슘(Ca2+) 동역학 조절, ER 항상성 유지, 대사 신호를 세포 상태 결정과 연결하는 과정에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. Ca2+ 의존적 신호전달 및 스트레스 반응성 경로에 미치는 영향을 통해 neuronatin은 신경세포 분화, 시냅스 기능, 지방세포 및 췌장 β세포 생물학, 에너지 균형 조절과 연관되어 왔습니다. NNAT 발현의 이상 조절은 대사 기능장애, 신경발달 관련 표현형, 종양 연관 세포 프로그램 등의 맥락에서 보고되어 왔으며, 이로 인해 Nnat는 발달 및 세포 스트레스 반응의 기전 연구에 유용한 표적(노드)로 간주됩니다.

Neuronatin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nnat 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nnat 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nnat의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Neuronatin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Neuronatin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nnat 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Neuronatin 기능에 중요한 Nnat 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nnat 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Neuronatin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Neuronatin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nnat 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Neuronatin HDR 플라스미드 (m) 및 Neuronatin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nnat 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nnat 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.