Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429641

概要

Nav2は、ニューロンに豊富に発現する細胞骨格関連タンパク質であるニューロン・ナビゲーター2（neuron navigator 2）をコードしており、微小管ダイナミクスと成長円錐の挙動を協調的に制御することで、神経突起伸長、軸索ガイダンス、神経細胞移動に関与するとされています。発生期および成熟期のマウス神経系において、NAV2は、ガイダンス因子に応答した極性の確立や方向性のある伸長など、神経回路形成を形作る過程と関連しています。NAV2に関連する経路の変化は、連結性の破綻や軸索パターニング異常が中心的特徴となる神経発達表現型や神経系機能障害の文脈で研究されてきました。そのためNav2は、疾患関連の細胞モデルにおける神経細胞形態形成および細胞骨格リモデリングの機構を解析する上で有用な標的です。

Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNav2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nav2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nav2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Neuron navigator 2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Neuron navigator 2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nav2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Neuron navigator 2の機能に不可欠なNav2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nav2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNeuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nav2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Neuron navigator 2 HDRプラスミド（m）および Neuron navigator 2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNav2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNav2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。