netrin-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403229
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- netrin-4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico netrin-4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:netrin-4 Anticorpo (A-7): sc-365280
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
netrin-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403229 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **NTN4** codifica a netrina-4, uma molécula de orientação secretada, relacionada à laminina, que modula as interações célula–matriz e a migração direcional. A netrina-4 participa do direcionamento axonal, da padronização vascular e da morfogênese tecidual ao influenciar a organização da matriz extracelular e a sinalização mediada por receptores que molda a dinâmica do citoesqueleto. Em contextos endoteliais e epiteliais, pode afetar a adesão e as propriedades de barreira por meio de comunicação cruzada com vias associadas a integrinas e à laminina. A desregulação da expressão ou da sinalização de **NTN4** tem sido associada a angiogênese anormal e comportamento invasivo no câncer e em outros distúrbios que envolvem remodelamento alterado da membrana basal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO netrin-4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NTN4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NTN4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NTN4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína netrin-4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NTN4 para a investigação da sinalização de netrin-4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NTN4 críticos para a função netrin-4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NTN4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo netrin-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo netrin-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NTN4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo netrin-4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR netrin-4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NTN4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NTN4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.