NEDL2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-435931-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NEDL2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NEDL2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase NEDL2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hecw2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NEDL2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-435931-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NEDL2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-435931-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hecw2 codifica a NEDL2, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo HECT que medeia a ubiquitinação de substratos para controlar a estabilidade de proteínas e a saída de sinalização. A atividade da NEDL2 contribui para a proteostase e para a regulação de processos celulares como o desenvolvimento neuronal, a função sináptica e vias responsivas ao estresse, por meio da degradação direcionada de proteínas regulatórias. Em modelos murinos e na genética humana, HECW2/NEDL2 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento, incluindo alterações na maturação neuronal e defeitos de sinalização, o que a torna relevante para estudos mecanísticos da biologia do sistema nervoso. Como ligase E3, a NEDL2 oferece um ponto de controle para investigar como a ubiquitina regula a dinâmica de vias e transições de estado celular.
NEDL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hecw2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hecw2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hecw2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hecw2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.