NDUFS3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404639

Visão geral

O NDUFS3 codifica uma subunidade essencial do complexo I da cadeia respiratória mitocondrial (NADH:ubiquinona oxidorredutase), codificada no núcleo, que sustenta a transferência de elétrons do NADH para a ubiquinona e ajuda a manter a eficiência da fosforilação oxidativa. Como componente estrutural central do complexo na membrana interna mitocondrial, o NDUFS3 contribui para a montagem e a estabilidade do complexo I, influenciando o potencial de membrana mitocondrial, a produção de ATP e a homeostase de espécies reativas de oxigênio. A perturbação de subunidades do complexo I, incluindo o NDUFS3, está associada à disfunção mitocondrial, que pode afetar tecidos de alta demanda energética e respostas mais amplas de estresse celular. Assim, o NDUFS3 é relevante para estudos de bioenergética, controle de qualidade mitocondrial e reprogramação metabólica em modelos celulares pertinentes a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NDUFS3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NDUFS3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NDUFS3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NDUFS3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NDUFS3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NDUFS3 para a investigação da sinalização de NDUFS3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NDUFS3 críticos para a função NDUFS3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NDUFS3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NDUFS3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NDUFS3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NDUFS3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NDUFS3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NDUFS3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NDUFS3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NDUFS3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.