NaBC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405950

概要

BCAS1（brain enriched myelin associated protein 1、脳に豊富に発現するミエリン関連タンパク質1。NaBC1とも呼ばれる）は、中枢神経系で高発現するヒト遺伝子であり、オリゴデンドロサイト系譜細胞および活発な髄鞘化のマーカーとして広く用いられています。その発現はオリゴデンドロサイトの分化やミエリン形成プログラムと関連しており、軸索の絶縁や白質成熟を制御する細胞プロセスと結び付いています。脱髄や神経変性の文脈を扱う研究ではBCAS1/NaBC1発現の変化が報告されており、ミエリン喪失と修復の機構を調べる上での重要性を支持しています。系譜関連因子としてのBCAS1は、オリゴデンドロサイトの状態遷移を形作る転写ネットワークやプロテオスタシス（タンパク質恒常性）ネットワークを解析するための手がかりとなります。

NaBC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBCAS1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BCAS1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BCAS1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NaBC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NaBC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BCAS1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NaBC1の機能に不可欠なBCAS1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BCAS1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NaBC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNaBC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BCAS1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NaBC1 HDRプラスミド（h）および NaBC1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBCAS1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBCAS1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。