myogenin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421806

概要

Myog はミオジェニン（myogenin）をコードしており、ミオジェニンは塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）型の転写因子で、MYOD1 および MYF5 の下流で機能して骨格筋の終末分化を駆動します。ミオジェニンは E-box モチーフに結合し、筋芽細胞の細胞周期からの離脱、筋管（ミオチューブ）形成、ならびにサルコメア関連遺伝子や筋構造遺伝子の活性化を制御する転写プログラムを統合的に調節します。ミオジェニンは中核的な筋形成制御ネットワークの一部として働き、系譜決定を調節するクロマチンリモデリング機構や MAPK/PI3K に連結したシグナル入力とも相互作用します。ミオジェニン関連の転写プログラムの破綻は、マウスモデル系における筋形成不全、筋再生、神経筋疾患の機序研究において重要な観点となります。

myogenin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMyog遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Myog内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Myogのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、myogeninタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、myogeninシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Myog欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• myogeninの機能に不可欠なMyogエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Myogゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• myogenin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびmyogenin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Myog遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  myogenin HDRプラスミド（m）および myogenin HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMyogホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMyog標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。