Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Myc (m): sc-421770
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Myc Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Myc, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Myc Antibody (9E10): sc-40
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Myc (m) | sc-421770 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Myc code le facteur de transcription MYC, un régulateur central de la croissance cellulaire, de l’accumulation de biomasse et de la progression du cycle cellulaire dans les cellules de souris. MYC se lie aux éléments E-box pour piloter de vastes programmes d’expression génique qui coordonnent la biogenèse des ribosomes, le métabolisme des nucléotides et des acides aminés, ainsi que la fonction mitochondriale, tout en intégrant des signaux provenant de voies telles que MAPK/ERK, PI3K–AKT–mTOR et WNT/β-caténine. Un contrôle strict de Myc est indispensable au développement normal et à l’homéostasie tissulaire, et sa dérégulation est fortement associée à la transformation oncogénique et à des états de différenciation altérés. Comme MYC influence l’apoptose, les réponses au stress de réplication de l’ADN et l’accessibilité de la chromatine, il est largement étudié en biologie du cancer, dans les programmes des cellules souches et dans le remodelage métabolique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Myc (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Myc dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Myc, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Myc à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Myc.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Myc pour l'étude de la signalisation de Myc, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Myc essentiels à la fonction de Myc
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Myc pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Myc plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Myc plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Myc. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Myc plasmide HDR (m) et le Myc (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Myc pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Myc définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.