Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421770
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myc O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myc, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myc Anticorpo (9E10): sc-40
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421770 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Myc codifica o fator de transcrição MYC, um regulador central do crescimento celular, do acúmulo de biomassa e da progressão do ciclo celular em células de camundongo. O MYC liga-se a elementos E-box para controlar programas amplos de expressão gênica que coordenam a biogênese de ribossomos, o metabolismo de nucleotídeos e aminoácidos e a função mitocondrial, ao mesmo tempo em que integra sinais de vias como MAPK/ERK, PI3K–AKT–mTOR e WNT/β-catenina. Um controle rigoroso de Myc é necessário para o desenvolvimento normal e a homeostase tecidual, e sua desregulação está fortemente ligada à transformação oncogênica e a estados de diferenciação alterados. Como o MYC influencia a apoptose, as respostas ao estresse de replicação do DNA e a acessibilidade da cromatina, ele é amplamente estudado na biologia do câncer, em programas de células-tronco e na remodelação metabólica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myc (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Myc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Myc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Myc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myc.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Myc para a investigação da sinalização de Myc, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Myc críticos para a função Myc
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Myc para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Myc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myc Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Myc (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Myc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Myc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.