Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401774
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mts1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mts1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mts1 Anticorpo (A-7): sc-377059
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401774 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
S100A4 codifica Mts1, uma proteína da família S100 que se liga a Ca2+ e atua como reguladora da dinâmica do citoesqueleto, da motilidade celular e da sinalização intercelular. Mts1 interage com alvos como a miosina II não muscular e componentes do remodelamento de actina para influenciar a renovação de adesões, a migração e as respostas à matriz extracelular. É expressa em diversos tipos celulares, incluindo fibroblastos e populações imunes, e é frequentemente utilizada como marcador de programas estromais ativados. A expressão desregulada de S100A4 tem sido associada ao remodelamento inflamatório e a fenótipos de invasão/metástase associados a tumores, o que a torna relevante para estudos de fibrose tecidual, tráfego de células imunes e disseminação de células cancerosas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mts1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene S100A4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do S100A4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do S100A4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mts1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de S100A4 para a investigação da sinalização de Mts1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) S100A4 críticos para a função Mts1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos S100A4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus S100A4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mts1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Mts1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia S100A4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo S100A4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.