Msx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405732

概要

MSX1は、ホメオボックス型転写因子Msx-1をコードしており、胚発生におけるパターン形成や系譜決定を制御する因子として、頭蓋顔面、四肢、歯の形成過程で上皮‐間葉相互作用の協調に関与します。Msx-1はBMPやWNTに関連する転写プログラムなど、発生シグナルからの入力を統合し、前駆細胞集団における増殖・分化・アポトーシスを調節します。MSX1の発現異常や機能喪失変異は、形態形成や組織特異化における役割を反映して、先天性の頭蓋顔面および歯の発生異常と関連づけられています。成人の文脈においても、発生生物学やがん生物学のモデルで、細胞可塑性や分化状態への影響という観点からMSX1活性の変化が研究されています。

Msx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMSX1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MSX1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MSX1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Msx-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Msx-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MSX1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Msx-1の機能に不可欠なMSX1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MSX1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Msx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMsx-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MSX1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Msx-1 HDRプラスミド（h）および Msx-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMSX1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMSX1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。