非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
mSHMT 抗体 (F-11): sc-390641. A-673 (A), A-431 (B), Raji (C), WEHI-231 (D) 和 EOC 20 (E) 全细胞裂解液中 mSHMT 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
mSHMT CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-430789
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- mSHMT CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在mSHMT基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：mSHMT: sc-390641，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
mSHMT CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-430789 | 20 µg | $397.00 |
概述
Shmt2 编码线粒体丝氨酸羟甲基转移酶（mSHMT）。该酶依赖磷酸吡哆醛（PLP），在线粒体一碳循环中催化丝氨酸与甘氨酸的可逆相互转化，同时生成 5,10-亚甲基四氢叶酸。该活性支持叶酸介导的一碳单位转移，而这一过程对核苷酸生物合成、甲基化反应以及通过与 NADPH 生成和线粒体代谢相联系的氧化还原稳态至关重要。通过调控线粒体叶酸通量，SHMT2 影响快速分裂细胞的增殖程序、氧化应激反应和代谢适应。SHMT2 功能异常与代谢重编程和基因组维护缺陷相关，这些发现对肿瘤生物学和线粒体功能障碍研究具有重要意义。
mSHMT CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Shmt2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Shmt2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Shmt2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使mSHMT蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Shmt2缺失的细胞模型，用于mSHMT信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 mSHMT 功能至关重要的 Shmt2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Shmt2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 mSHMT CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 mSHMT CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Shmt2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 mSHMT HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 mSHMT HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Shmt2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Shmt2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。