MRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402219

概要

ABCC6はATP結合カセット（ABC）トランスポーターであるMRP6をコードしており、主に肝臓と腎臓で発現する形質膜上の排出ポンプとして、細胞外のヌクレオチドおよび代謝産物の恒常性を調節します。MRP6の活性はプリン作動性シグナル伝達や無機ピロリン酸（PPi）のバランスに影響し、トランスポーター機能を、異所性石灰化や結合組織の健全性を制御する経路と結び付けます。ABCC6の機能喪失変異は、弾性線維性仮性黄色腫（pseudoxanthoma elasticum）や関連する石灰化表現型と関連しており、細胞外マトリックスのリモデリング、血管石灰化、ならびに組織特異的なトランスポーター生物学を研究する上で重要な標的となります。ABCC6/MRP6モデルはまた、ABCトランスポーターのトラフィッキング、ATP依存的な基質輸送、そして多剤耐性関連タンパク質（MRP）間の代償経路の解析にも有用です。

MRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるABCC6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ABCC6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ABCC6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MRP6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MRP6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ABCC6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MRP6の機能に不可欠なABCC6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ABCC6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ABCC6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MRP6 HDRプラスミド（h）および MRP6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはABCC6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のABCC6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。