MRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400456-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MRP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MRP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABCC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRP1 Anticorpo (QCRL-1): sc-18835
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400456-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400456-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCC1 codifica a proteína humana associada à resistência a múltiplos fármacos 1 (MRP1), um transportador da família ATP-binding cassette (ABC) que medeia o efluxo dependente de ATP de ânions orgânicos, xenobióticos e metabólitos conjugados a glutationa, glicuronídeo e sulfato. A MRP1 contribui para a desintoxicação celular e a homeostase redox ao regular o equilíbrio intracelular de glutationa e o transporte de leucotrieno C4 e outros mediadores inflamatórios. Por meio do seu papel no transporte de membrana e em vias de resposta ao estresse, a atividade de ABCC1 influencia a distribuição intracelular de fármacos, o manejo do estresse oxidativo e funções de barreira em diversos tecidos. A expressão ou função desregulada de ABCC1/MRP1 é frequentemente estudada no contexto de fenótipos de resistência a múltiplos fármacos, sinalização inflamatória e transporte alterado de metabólitos observados em múltiplos modelos de doença.
MRP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABCC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABCC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABCC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABCC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.