mPRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402143

概要

PAQR7は、PAQRファミリーに属する7回膜貫通型のプロゲスチン受容体である膜プロゲステロン受容体α（mPRα）をコードし、形質膜および細胞内膜において、迅速な非ゲノム性プロゲステロンシグナル伝達を仲介します。mPRαは、環状ヌクレオチドシグナル、キナーゼカスケード、カルシウムフラックス、アポトーシスおよび細胞運動性の制御などの細胞過程に影響し、下流のセカンドメッセンジャー経路を介して、状況依存的に転写プログラムにも作用します。PAQR7の発現は生殖組織・非生殖組織の両方で報告されており、ステロイドホルモン応答性、神経内分泌調節、免疫および上皮シグナル伝達における役割が示唆されています。mPRαシグナルの異常は、ホルモン応答性の生物学や、生殖障害、ホルモン関連がんモデルなどの疾患関連コンテキストで検討されており、プロゲステロン応答性の変化が増殖、浸潤、ストレス適応経路に影響し得ることが示されています。

mPRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPAQR7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PAQR7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PAQR7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、mPRαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、mPRαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PAQR7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• mPRαの機能に不可欠なPAQR7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PAQR7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• mPRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびmPRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PAQR7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  mPRα HDRプラスミド（h）および mPRα HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPAQR7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPAQR7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。