Plasmide Double Nickase (h) MPDZ: sc-406839-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MPDZ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MPDZ Double Nickase (h) et le plasmide MPDZ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MPDZ. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MPDZ | sc-406839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MPDZ | sc-406839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MPDZ code une protéine échafaudage à domaines PDZ multiples qui organise des complexes de signalisation et de trafic au niveau des jonctions des cellules épithéliales et neuronales, contribuant à l’assemblage des jonctions serrées, à la polarité apico-basale et à la régulation de la localisation des protéines membranaires. En reliant des partenaires transmembranaires à des effecteurs du cytosquelette et de la signalisation, MPDZ influence des processus tels que l’adhésion cellule–cellule, la fonction barrière et le remodelage jonctionnel. Une altération de la fonction de MPDZ a été associée à des défauts du neurodéveloppement et de l’intégrité épithéliale, notamment à des liens rapportés avec l’hydrocéphalie et des pathologies liées aux jonctions. En tant qu’adaptateur jouant un rôle de plateforme, MPDZ est fréquemment étudiée pour comprendre comment les interactions médiées par les PDZ coordonnent les réseaux de polarité et la dynamique de la signalisation aux jonctions.
MPDZ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MPDZ dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MPDZ. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MPDZ. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MPDZ.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.