MPDZ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406839-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MPDZO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MPDZ (h) e o Plasmídeo Double Nickase MPDZ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MPDZ. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MPDZ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MPDZ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MPDZ codifica uma proteína de ancoragem (scaffold) com múltiplos domínios PDZ que organiza complexos de sinalização e de tráfego em junções celulares epiteliais e neuronais, contribuindo para a montagem das junções apertadas (tight junctions), a polaridade ápico-basal e a regulação da localização de proteínas de membrana. Ao conectar parceiros transmembrana a efetores do citoesqueleto e da sinalização, MPDZ influencia processos como adesão célula–célula, função de barreira e remodelamento das junções. Alterações na função de MPDZ têm sido associadas a defeitos no neurodesenvolvimento e na integridade epitelial, incluindo relatos de ligação com hidrocefalia e patologias relacionadas a junções. Como um adaptador do tipo “hub”, MPDZ é frequentemente estudada para entender como interações mediadas por PDZ coordenam redes de polaridade e a dinâmica de sinalização nas junções.
MPDZ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MPDZ em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MPDZ. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MPDZ. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MPDZ interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.