Plasmide Double Nickase (h) MOZ: sc-403564-NIC

KAT6A (MOZ) code une histone acétyltransférase de la famille MYST qui acétyle principalement l’histone H3 (notamment H3K9 et H3K14) afin de favoriser une chromatine ouverte et l’activation transcriptionnelle. MOZ agit au sein de complexes multiprotéiques de régulation de la chromatine et coordonne l’activité des enhancers et des promoteurs, influençant la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN et des programmes d’expression génique spécifiques de lignée. Dans des contextes hématopoïétiques et du développement, KAT6A contribue au maintien des états transcriptionnels nécessaires à l’auto-renouvellement et à la différenciation des progéniteurs. La dérégulation de KAT6A, via des mutations, une modification de dosage ou des réarrangements chromosomiques, a été associée à un contrôle transcriptionnel aberrant et à des phénotypes oncogéniques ou neurodéveloppementaux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques centrées sur l’épigénétique.

MOZ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KAT6A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KAT6A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KAT6A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KAT6A.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.