MOAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425675-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MOAP1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MOAP1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MOAP1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Moap1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MOAP1 Anticorpo (E-8): sc-271467
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MOAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425675-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MOAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425675-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Moap1 codifica o modulador da apoptose 1 (MOAP1), uma proteína associada às mitocôndrias que promove a sinalização apoptótica intrínseca ao facilitar a ativação de BAX e a permeabilização da membrana externa mitocondrial. Em células de camundongo, a MOAP1 participa de programas de morte celular induzidos por estresse e interage com vias relacionadas a p53 e TNF que regulam a sobrevivência, a integridade mitocondrial e a ativação de caspases. Alterações na atividade de MOAP1 têm sido estudadas em contextos em que a apoptose está desregulada, incluindo biologia tumoral e modelos de neurodegeneração. Assim, a perturbação de Moap1 é útil para investigar como checkpoints mitocondriais moldam a homeostase tecidual e as respostas ao estresse.
MOAP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Moap1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Moap1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Moap1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Moap1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.