Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MMP9 Double Nickaseプラスミド (m): sc-421679-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- MMP9 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- MMP9ダブルニカースプラスミド（m）およびMMP9ダブルニカースプラスミド（m2）は、Mmp9を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: MMP9 抗体 (E-11): sc-393859
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
MMP9 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-421679-NIC | 20 µg | $410.00 |
マトリックスメタロプロテイナーゼ9（MMP9）は、マウスのMmp9遺伝子にコードされる分泌性の亜鉛依存性エンドペプチダーゼであり、細胞外マトリックス成分を分解するとともに、生理活性分子をプロセシングして組織リモデリングを制御する。MMP9の活性は、白血球の遊走、サイトカインおよびケモカインの勾配形成、血管新生、創傷修復を制御する経路と交差しており、炎症シグナル伝達や細胞外マトリックスのターンオーバーの文脈で頻繁に研究されている。腫瘍微小環境や慢性炎症では、Mmp9発現の変化が基底膜の完全性、免疫細胞浸潤、血管透過性に影響を及ぼし得る。MMP9の制御異常は、がん進展、関節炎、神経炎症、線維化リモデリングのマウスモデルと関連づけられており、マトリックス駆動性表現型の機序研究における一般的な標的となっている。
MMP9 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Mmp9 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Mmp9内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Mmp9の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Mmp9が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。