MMP-20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405838

概要

MMP20は、マトリックスメタロプロテアーゼ20（MMP-20、エナメリシン）をコードしており、細胞外マトリックス（ECM）のリモデリングに特化した亜鉛依存性エンドペプチダーゼで、特にエナメル質形成期に高い活性を示します。構造的マトリックスタンパク質の切断やECM成分のプロセシングを通じて、MMP-20は組織の成熟および石灰化過程を協調させる制御されたプロテオリシスに寄与します。その活性は、細胞―マトリックス相互作用、プロテアーゼ活性化カスケード、細胞外シグナル伝達の動態を形作る、より広範なメタロプロテアーゼ制御経路とも連関しています。MMP20機能の破綻はエナメル質発生の異常と関連しており、疾患生物学に関わる組織微小環境のプロテオリシス駆動性変化という観点からも検討されています。

MMP-20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMMP20遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MMP20内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MMP20のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MMP-20タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MMP-20シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MMP20欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MMP-20の機能に不可欠なMMP20エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MMP20ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MMP-20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMMP-20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MMP20遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MMP-20 HDRプラスミド（h）および MMP-20 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMMP20ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMMP20標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。