MMP-13 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400626-NIC

MMP13は、組織リモデリングの過程で線維性コラーゲンやその他の細胞外マトリックス基質を分解する、分泌型の亜鉛依存性エンドペプチダーゼであるマトリックスメタロプロテイナーゼ13（MMP-13）をコードします。その活性は、プロペプチドの活性化、メタロプロテイナーゼ阻害因子（TIMP）による制御、ならびにMAPKやNF-κBなどのサイトカイン／増殖因子経路からのシグナル入力によって調節され、炎症プログラムとリモデリングプログラムの協調に関与します。MMP-13の異常発現は、細胞外マトリックスのターンオーバー、細胞—マトリックス間シグナル伝達の変化、侵襲性表現型に寄与し、変形性関節症、関節リウマチ、線維化、腫瘍微小環境のリモデリングといった病態との関連が示されています。マトリックス動態の指標であると同時に駆動因子でもあるMMP-13は、コラーゲン分解（カタボリズム）、軟骨細胞の生物学、ストローマ—上皮間相互作用の解析に広く用いられています。

MMP-13 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における MMP13 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、MMP13内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、MMP13の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、MMP13が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。