Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MISR II: sc-402523-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MISR II correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MISR II Double Nickase (h) et le plasmide MISR II Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AMHR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MISR II Antibody (D-9): sc-377413
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MISR II | sc-402523-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MISR II | sc-402523-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMHR2 (MISR II) code le récepteur de type II de l’hormone anti‑Müllérienne, une sérine/thréonine kinase transmembranaire qui initie la signalisation en réponse à l’AMH. Après fixation du ligand, MISR II recrute des récepteurs de type I et active la phosphorylation de SMAD1/5/8, déclenchant des programmes transcriptionnels en aval qui régulent la régression des canaux de Müller et, plus largement, la différenciation des tissus reproducteurs. Dans les cellules humaines, l’activité d’AMHR2 s’entrecroise avec des voies du développement et endocrines qui façonnent la fonction gonadique et la biologie de l’appareil reproducteur. Une expression ou une signalisation d’AMHR2 dérégulée a été associée à des troubles du développement sexuel et a été étudiée dans le contexte des tumeurs des cellules de la granulosa de l’ovaire et d’autres pathologies de l’appareil reproducteur.
MISR II Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AMHR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AMHR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AMHR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AMHR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.