MIP-1γ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422849

概要

Ccl9 は CC ケモカインである MIP-1γ をコードしており、MIP-1γ は分泌性メディエーターとして、単球やマクロファージなどの骨髄系細胞集団の走化性および活性化を促進することで、自然免疫細胞の動員・遊走を調節します。MIP-1γ シグナルは炎症性サイトカインネットワークや白血球リクルート機構に寄与し、NF-κB 駆動性応答や、より広範なケモカイン受容体シグナル伝達カスケードとも交差します。マウス組織では、Ccl9 発現は免疫活性化状態や微小環境のリモデリングと結び付いて認められることが多く、炎症、宿主防御、免疫細胞間クロストークの研究を支えます。MIP-1γ を含むケモカイン勾配の破綻は、骨髄系細胞の浸潤が病態に影響する慢性炎症性疾患、感染症、腫瘍関連炎症のモデルにおいて重要です。

MIP-1γ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCcl9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ccl9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ccl9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MIP-1γタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MIP-1γシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ccl9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MIP-1γの機能に不可欠なCcl9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ccl9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MIP-1γ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMIP-1γ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ccl9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MIP-1γ HDRプラスミド（m）および MIP-1γ HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCcl9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCcl9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。