mGluR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406953

Visão geral

GRM7 codifica o recetor metabotrópico de glutamato 7 (mGluR-7), um GPCR de classe C que se acopla principalmente a proteínas Gi/o para reduzir a atividade da adenilil ciclase e modular a função de canais iónicos. Enriquecido nas zonas ativas pré-sinápticas, o mGluR-7 atua como autorrecetor/heterorrecetor, atenuando a libertação de neurotransmissores e ajustando a transmissão e a plasticidade sinápticas através da sinalização cAMP/PKA e de vias MAPK/ERK a jusante. Pelo seu papel na regulação do equilíbrio excitatório–inibitório e da excitabilidade dos circuitos, o GRM7 é frequentemente estudado no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, bem como de mecanismos de suscetibilidade a crises convulsivas e de comportamentos relacionados com o stress. A sinalização do mGluR-7 humano também é relevante para a organização sináptica e a remodelação dependente da atividade, tornando-o um nó útil para a investigação de vias em modelos neuronais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO mGluR-7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRM7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRM7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRM7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína mGluR-7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRM7 para a investigação da sinalização de mGluR-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRM7 críticos para a função mGluR-7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRM7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo mGluR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo mGluR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRM7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo mGluR-7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR mGluR-7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRM7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRM7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.