MFG-E8 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421639

개요

Mfge8는 milk fat globule-EGF factor 8(MFG-E8)을 암호화하는 유전자로, MFG-E8은 분비형 당단백질이며 세포사멸(apoptosis)한 세포 표면의 포스파티딜세린(phosphatidylserine)과 식세포(phagocyte) 표면의 ITGAV/ITGB3 및 ITGAV/ITGB5 같은 인테그린(integrin)을 연결해 줌으로써 사멸세포 제거(efferocytosis)를 촉진하고 2차 괴사(secondary necrosis)를 억제합니다. 이러한 옵소닌(opsonization)-유사 작용을 통해 MFG-E8은 면역 항상성, 염증 해소(resolution of inflammation), 조직 재형성(tissue remodeling)에 영향을 미치며, 그 하위 과정으로 사이토카인 신호전달과 대식세포 활성화 상태에도 변화를 유도합니다. 마우스 시스템에서는 Mfge8 기능의 변화가 죽어가는 세포의 제거 이상, 만성 염증성 표현형, 그리고 혈관·대사·신경염증 환경 전반에서의 손상된 복구 반응과 연관되는 것으로 보고되어 왔습니다.

MFG-E8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mfge8 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mfge8 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mfge8의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MFG-E8 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MFG-E8 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mfge8 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MFG-E8 기능에 중요한 Mfge8 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mfge8 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MFG-E8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MFG-E8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mfge8 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MFG-E8 HDR 플라스미드 (m) 및 MFG-E8 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mfge8 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mfge8 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.