Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MCM6: sc-402146-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MCM6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MCM6 Double Nickase (h) et le plasmide MCM6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MCM6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MCM6 Antibody (H-8): sc-393618
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MCM6 | sc-402146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MCM6 | sc-402146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM6 code une sous-unité essentielle du complexe hélicase MCM2–7, qui autorise l’activation des origines de réplication de l’ADN et assure la progression des fourches de réplication pendant la phase S. Grâce à son chargement régulé sur la chromatine avec ORC, CDC6 et CDT1, MCM6 contribue à la duplication du génome, aux réponses au stress réplicatif et à la coordination avec les voies de contrôle (checkpoints) telles qu’ATR/CHK1. Une expression ou une activité dérégulée de MCM6 est fréquemment utilisée comme marqueur de la capacité proliférative et a été associée à des phénotypes d’instabilité génomique observés dans divers cancers et autres états d’hyperprolifération. La perturbation de MCM6 constitue une approche directe pour étudier l’autorisation des origines, la stabilité des fourches et le contrôle du cycle cellulaire dans les cellules humaines.
MCM6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MCM6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MCM6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MCM6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MCM6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.