Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MCM5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401980-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCM5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCM5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MCM5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MCM5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCM5 Anticorpo (E-10): sc-165994
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCM5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCM5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM5 codifica uma subunidade central do complexo helicase de manutenção de minicromossomos (MCM2–7), que licencia as origens de replicação e promove o desenrolamento do DNA durante a fase S. Ao coordenar o início da replicação, a progressão da forquilha e a estabilidade do replissoma, MCM5 contribui para a integridade do genoma e para transições ordenadas do ciclo celular por meio dos checkpoints da fase S e de G2/M. A expressão desregulada de MCM5 ou alterações no licenciamento da replicação estão associadas a estresse replicativo, instabilidade cromossômica e fenótipos proliferativos observados em múltiplos contextos de câncer. Como fator de replicação, MCM5 é frequentemente utilizado para investigar o tempo de replicação do DNA, a sinalização de checkpoints e os mecanismos que acoplam a replicação às respostas a danos no DNA.
MCM5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MCM5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MCM5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MCM5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MCM5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.