MCM3AP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406369

概要

MCM3AP（MCM3関連タンパク質）は、MCM2–7ヘリカーゼ複合体と相互作用し、DNA複製および細胞周期進行の制御に寄与する多機能な核内因子である。複製ライセンシングと転写制御、さらにRNA代謝を協調させるプロセスに関与するとされ、ゲノム維持能や増殖能における役割が示唆されている。MCM3APの機能破綻や発現変動は、複製ストレス、クロマチン関連シグナル伝達、ならびにゲノム安定性に影響するDNA損傷応答における細胞応答との関連で検討されてきた。これらの機構は、複製―転写の衝突やチェックポイント機能不全が主要な研究テーマとなるがん生物学やその他の増殖性疾患の領域で、しばしば解析対象となる。

MCM3AP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMCM3AP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MCM3AP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MCM3APのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MCM3APタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MCM3APシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MCM3AP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MCM3APの機能に不可欠なMCM3APエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MCM3APゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MCM3AP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMCM3AP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MCM3AP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MCM3AP HDRプラスミド（h）および MCM3AP HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMCM3APホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMCM3AP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。