Mcl-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421589-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mcl-1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Mcl-1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Mcl-1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mcl1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mcl-1 Anticorpo (B-6): sc-74436
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mcl-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421589-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mcl-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421589-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Mcl1** de camundongo codifica a **Mcl-1**, uma proteína antiapoptótica da família **BCL-2** que preserva a integridade da membrana externa mitocondrial ao sequestrar fatores pró-morte do tipo **BH3-only** e limitar a permeabilização mediada por **BAX/BAK**. A Mcl-1 é uma proteína de meia-vida curta, rigidamente regulada por programas transcricionais e pela degradação via **ubiquitina–proteassoma**, o que a conecta a respostas ao estresse celular, sinalização por fatores de crescimento e adaptação metabólica. Ao modular os limiares da apoptose intrínseca, a Mcl-1 influencia a homeostase de células imunes, a sobrevivência hematopoética e o desenvolvimento tecidual, e alterações na regulação de **Mcl1** são frequentemente estudadas em contextos de sinalização oncogênica, inflamação e modelos de morte celular induzida por tratamento. Seu papel central na apoptose mitocondrial torna **Mcl1** um nó comum para investigar circuitos de sobrevivência e a comunicação cruzada entre vias envolvendo **MAPK**, **PI3K/AKT** e respostas ao estresse do retículo endoplasmático.
Mcl-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mcl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mcl1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mcl1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mcl1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.