MC1-R Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421583-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MC1-RO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MC1-R (m) e o Plasmídeo Double Nickase MC1-R (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mc1r. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MC1-R Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421583-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MC1-R Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421583-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Mc1r de camundongo codifica o receptor de melanocortina 1 (MC1-R), um receptor acoplado à proteína G que regula a diferenciação de melanócitos e a alternância de pigmento em resposta a ligantes melanocortínicos, como o α-MSH. O MC1-R sinaliza principalmente por vias de cAMP/PKA dependentes de Gαs, influenciando programas transcricionais dependentes de MITF, a síntese de melanina e as respostas celulares ao estresse induzido por UV. Variações genéticas ou alterações na expressão do MC1-R estão associadas a mudanças na cor da pelagem e em fenótipos de pigmentação em camundongos, sendo amplamente relevantes para estudos de biologia de melanócitos e de estresse oxidativo associado a pigmentos. Como um nó de via que integra a sinalização por melanocortinas ao controle transcricional da melanogênese, o MC1-R oferece um alvo acessível para dissecar a sinalização de GPCRs em células pigmentares.
MC1-R O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mc1r em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mc1r. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mc1r. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mc1r interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.