MAP-1S CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406495

概要

MAP1Sは、微小管結合タンパク質1S（MAP-1S）をコードしており、微小管をオートファジー機構につなぐ細胞骨格アダプターとして、細胞内輸送、オルガネラの動態、ならびに細胞ストレス応答に影響を与えます。MAP-1Sはオートファゴソーム形成やカーゴの取り扱いの調節に関与するとされ、微小管の安定性をプロテオスタシスやミトコンドリア品質管理と結び付けています。これらの過程を通じて、MAP1Sは酸化ストレスや代謝攪乱に対する恒常性維持応答に寄与し、これらの経路はがんや神経変性疾患でしばしば変化します。MAP1Sの発現や機能の変化は、腫瘍生物学やその他のストレス関連病態に関わる、オートファジーの破綻やゲノム安定性の異常表現型と関連付けられています。

MAP-1S CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMAP1S遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MAP1S内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MAP1Sのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MAP-1Sタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MAP-1Sシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MAP1S欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MAP-1Sの機能に不可欠なMAP1Sエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MAP1Sゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MAP-1S CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMAP-1S CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MAP1S遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MAP-1S HDRプラスミド（h）および MAP-1S HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMAP1Sホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMAP1S標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。