Particules Lentivirales d'Activation (h) MALT1: sc-400791-LAC

MALT1 (mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1) est une paracaspase et une protéine d’échafaudage qui couple la signalisation des récepteurs de l’antigène à l’activation des voies NF-κB et MAPK. Au sein du complexe CARD11–BCL10–MALT1 (CBM), elle favorise la signalisation de la kinase IκB et clive certains substrats afin d’ajuster l’activation des lymphocytes, la production de cytokines et les programmes de survie cellulaire. La signalisation dépendante de MALT1 influence l’homéostasie immunitaire et les réponses inflammatoires, et le dérèglement de ce nœud a été associé à une activité anormale de NF-κB dans la biologie lymphoïde. En tant que régulateur des réponses transcriptionnelles en aval de l’engagement des récepteurs immunitaires, MALT1 est fréquemment étudiée dans des modèles de reprogrammation de la signalisation immunitaire et d’expression génique adaptative au stress.

Les particules d'activation lentivirales MALT1 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de MALT1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales MALT1 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription MALT1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de MALT1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif MALT1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.