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MAGE-L2慢病毒激活颗粒(m) | sc-424255-LAC | 200 µl | $455.00 |
Magel2 编码 MAGE-L2,它是黑色素瘤抗原基因(MAGE)家族的一员,在小鼠的下丘脑与神经元生物学中具有重要作用。MAGE-L2 参与蛋白质转运与稳定性的泛素依赖性调控,包括通过与 E3 泛素连接酶复合物相互作用来调节内体分选和受体周转。这些过程会影响神经内分泌信号传导、昼夜节律与摄食相关神经环路,以及对神经元功能至关重要的细胞内运输通路。MAGEL2 活性异常与神经发育和代谢表型相关,并常在影响下丘脑功能的综合征性疾病研究中被广泛关注。
MAGE-L2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Magel2 表达。
MAGE-L2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Magel2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性MAGE-L2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Magel2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。