M-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401232

概要

CDH15は、骨格筋に豊富に発現するカルシウム依存性の細胞間接着受容体であるMカドヘリンをコードしており、筋形成および筋再生の過程で、筋芽細胞の認識、整列、融合を支えます。カドヘリン介在性の接着結合と、βカテニン／p120カテニンおよびアクチン細胞骨格との連結を介して、Mカドヘリンは接触依存的シグナル伝達に寄与し、細胞骨格の再編成、遊走、分化プログラムに影響を与えます。CDH15の活性は、アドヘレンスジャンクションの動態を制御する経路とも交差し、組織修復やリモデリングに関わる細胞応答を調節し得ます。CDH15を含むカドヘリンの発現変化は、疾患状況における細胞接着や浸潤性行動の変化と関連づけられており、腫瘍細胞の細胞間相互作用や筋関連の病態生理の研究において重要です。

M-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDH15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDH15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDH15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、M-cadherinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、M-cadherinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDH15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• M-cadherinの機能に不可欠なCDH15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDH15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• M-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびM-cadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDH15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  M-cadherin HDRプラスミド（h）および M-cadherin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDH15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDH15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。