Date published: 2026-7-15

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LRP5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421465-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • LRP5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase LRP5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LRP5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lrp5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRP5 Anticorpo (B-9): sc-390267
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    LRP5 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-421465-NIC
    20 µg
    $410.00

    Lrp5 codifica a proteína relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa densidade 5 (LRP5), um correceptor de passagem única pela membrana que potencializa a sinalização canônica Wnt/β-catenina ao formar complexos induzidos por ligante com receptores Frizzled. Em tecidos de camundongo, a LRP5 contribui para a atividade dos osteoblastos, a regulação da massa óssea e a homeostase metabólica, e pode influenciar programas de proliferação e diferenciação celular por meio de transcrição dependente de β-catenina. A LRP5 também interage com moduladores extracelulares como DKK e esclerostina e coordena a saída da via durante o desenvolvimento e o remodelamento tecidual. A sinalização desregulada de Lrp5 é amplamente utilizada para modelar mecanismos relevantes a fenótipos esqueléticos e alterações na fisiologia tecidual impulsionadas por Wnt.

    LRP5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lrp5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lrp5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lrp5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lrp5 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.