Plasmide Double Nickase (h) LOC285636: sc-415435-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LOC285636 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LOC285636 Double Nickase (h) et le plasmide LOC285636 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C5orf51. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LOC285636 | sc-415435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LOC285636 | sc-415435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C5orf51 code la protéine humaine LOC285636, un produit génique encore incomplètement caractérisé et faiblement annoté fonctionnellement dans les bases de données actuelles de voies biologiques. Les données génomiques et transcriptomiques disponibles suggèrent une expression dépendante du contexte, ce qui justifie l’exploration de rôles potentiels dans les réseaux de régulation génique, le maintien des états cellulaires et des programmes spécifiques de lignée. Comme des loci de type « open reading frame » peu caractérisés peuvent influencer indirectement la maturation des ARN, la régulation associée à la chromatine ou la protéostasie, des études de perturbation sont couramment utilisées pour relier LOC285636 à des processus cellulaires définis. L’analyse des effets de la perturbation de LOC285636 dans des systèmes modèles pertinents peut aider à associer ce locus à des signatures moléculaires observées dans des phénotypes liés à des maladies, sans pour autant impliquer des résultats cliniques.
LOC285636 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C5orf51 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C5orf51. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C5orf51. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C5orf51.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.