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Lipin-1双切口酶质粒(m) | sc-420378-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Lpin1 基因编码 Lipin-1,这是一种 Mg²⁺ 依赖性的磷脂酸磷酸酶(PAP1),可将磷脂酸转化为二酰甘油,从而把甘油脂生物合成与膜脂重塑及脂质信号传导联系起来。除酶学功能外,Lipin-1 还能影响调控脂肪酸氧化和线粒体代谢的转录程序,将营养状态与代谢基因表达整合起来。Lpin1 活性会影响脂肪细胞分化、肝脏脂质处理以及骨骼肌能量稳态;在实验模型中,其失调与类似脂肪营养不良的表型、脂肪肝、胰岛素抵抗以及炎症性代谢应激相关。这些功能使 Lipin-1 成为研究脂质代谢通路、内质网–线粒体串扰以及代谢性疾病机制的关键节点。
Lipin-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Lpin1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Lpin1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Lpin1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Lpin1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。