Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LIMP II Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402532-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LIMP IIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LIMP II (h) e o Plasmídeo Double Nickase LIMP II (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SCARB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LIMP II Anticorpo (D-3): sc-55570
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LIMP II Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402532-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LIMP II Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402532-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCARB2 codifica a proteína integral de membrana lisossomal 2 (LIMP II), uma glicoproteína transmembranar do tipo III que dá suporte ao tráfego endolisossomal e à biogênese dos lisossomos. A LIMP II atua como receptor de direcionamento (sorting) para a glicocerebrosidase e contribui para o catabolismo de lipídios, a estabilidade da membrana lisossomal e a renovação associada à autofagia. SCARB2 também está implicado em vias de internalização mediada por receptores e pode influenciar processos de entrada viral por meio do roteamento endossomal. A desregulação de SCARB2/LIMP II tem sido associada a fenótipos relacionados a doenças de armazenamento lisossomal e neurodegeneração, tornando-o relevante para estudos de proteostase dependente de lisossomos e de respostas a estresse metabólico.
LIMP II O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SCARB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SCARB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SCARB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SCARB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.